PCR试验总是出现假阳性，明明没有加模板，最后却扩大了产品。假如经常发生这种情况，就要注意操作环境。
这里涉及到气溶胶的概念。气溶胶是一种胶体分散系统，由固体或液体的小质点分散，悬浮在气体介质中，可以在空气中停留至少几个小时。
在PCR反应过程中，不断升温降温，液体蒸发冷凝，PCR管内部气体形成气溶胶，携带大量DNA扩增产物(注意，1ng扩增产物中DNA片段的数量可以作为模板，DNA片段的数量可以在1ng启动模板中扩增数百万倍甚至更多。例如，人类基因组DNA有30亿次bp，需要扩增的单拷贝基因片段为300bp，在1ng启动模板中可以作为模板DNA片段，仅占启动模板DNA总数的千万分之一左右)。如果在实验室打开含有PCR的扩展管，
虽然DNA在整个房间环境中的含量很低，但理论上只要有一个DNA片段可以作为模板，PCR扩增就可以成功，这也是为什么在污染环境中阴性对比也可以扩增杂带的原因。因此，在专业的PCR实验室(如临床PCR实验室)中，通常需要四个隔离(或至少三个隔离)。常见的三个区域是指:
1、试剂配制区：PCR反应系统的配制区域。
2、标本处理区域：包括制备扩增模板，即提取DNA区域。
3、PCR扩增和产品分析区：PCR扩增区域，也是凝胶电泳分析扩增产品的区域。
如果PCR扩增区域的产品分析区域再次分离，则为四个区域隔离。四个区域隔离的主要目的是防止气溶胶在各个PCR区域之间的流动。最好的办法就是每个区域隔一栋楼，但是用起来不现实，所以有办法根据不同的区域设置正负压:
试剂配制区(Ⅰ区)：在最干净的区域，维持微正压使外部气体无法进入隔离污染源。此外，阴性模板应在该区域添加PCR管并盖上盖子。严禁在该区域打开和存放带有DNA模板的离心管。
添加DNA模板区域(Ⅱ区)：压力比Ⅰ区域较低，保证内部气体不泄漏，防止阳性模板气溶胶污染外部环境。
PCR产品分析区域的扩增和扩增(Ⅲ区)：保持负压，促使内部气体不泄漏，防止扩大产物的气溶胶污染外部环境。
操作时应遵循压力Ⅰ区→Ⅱ区→Ⅲ区域单向进行，不能反向进行。
由于PCR三区隔离的目的是阻挡气溶胶的交流，请注意以下细节，思考气溶胶从何而来：
1. 每个区域应配备特殊的移液器，不应交叉混合。我们的一位客户在电泳室的移液器上添加了一个模板，阴性对比扩大了明亮的杂带。
2. 各区域应配备专用移液器吸头，不得交叉混用。
3. 如条件允许，在PCR。Ⅲ工作结束后，再次进入PCR。 I区域需更换实验服，一次性鞋套，帽子，手套。
4. 在PCR I区、PCRⅡ带滤芯吸头的区域配置。
